內質網（ER）是真核生物細胞中的一種細胞器，其形成扁平的，膜封閉的囊或稱為池狀的管狀結構的互連網絡。 ER的膜與外核膜連續(xù)。 ER在大多數類型的真核細胞中發(fā)生，但在紅細胞和精子中不存在。 Cell Navigator 活細胞內質網（ER）染色試劑盒使用我們的ER Tracer Green作為ER標記物。 ER Tracer 綠色染色是一種細胞滲透性熒光染料，對ER具有高度選擇性。 該染色劑由綠色熒光染料和ER粘合劑組成，其在大多數細胞類型中選擇性地結合ER。 對于某些細胞，ER Tracer Green可能無法選擇性地與ER結合。 ER Tracer Green具有與FITC基本相同的光譜特性，使該試劑盒便于使用FITC濾光片組。

溶液配制

1.儲備溶液配制

        除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環(huán)。
ER Green 原液（500X）：
將20μLDMSO（組分C）加入到ER Green （組分A）的小瓶中并充分混合以制備500X ER Green 儲備溶液。 注意：20μL的500X ER Green 原液足以容納一個96孔板。 如果管子密封，未使用的500X ER Green 儲備溶液可以在≤-20oC下儲存兩周。 避光。

2.工作溶液配制

將20μL500XER Green 儲備溶液加入10 mL活細胞染色緩沖液（組分B）中，充分混合，制成ER Green 工作溶液。 該ER Green 工作溶液在室溫下穩(wěn)定至少2小時。 避光。有關細胞樣品制備的指南，請點擊查看。

操作步驟

1.在細胞板中加入100μL/孔（96孔板）或50μL/孔（384孔板）的ER Green TM工作溶液。 用37℃的工作溶液孵育細胞15-30分鐘，避光。 注意：ER探針的最佳濃度根據具體應用而有所不同。 濃度高于工作溶液可能對細胞有毒。 可以根據特定細胞類型和細胞或組織對探針的滲透性來修改染色條件。

2.在每個孔中移除ER Green 工作溶液。 用物理相關緩沖液洗滌細胞三次。

3.染色后修復細胞（可選）。 用4％甲醛固定細胞5-10分鐘。 用物理相關緩沖液洗滌細胞三次。

4.使用具有FITC濾光片組（Ex / Em = 490 / 520nm）的熒光顯微鏡觀察細胞中的熒光信號。